抗体检测怎么做?
最近收到很多关于“抗体(Anti-body)”的咨询,今天在这里给大家做个简版的介绍。 “抗抗体”(Antibody)是指人体免疫系统在对抗外界病原体(细菌、病毒等)的过程中生成的一种特殊蛋白质。不同类型的抗体具有不同的生理功能,而检测方法也各有不同。 目前临床上常用的检测方法有:胶体金法、免疫荧光法、酶联免疫吸附实验(ELISA)和化学发光免疫分析法,其中 ELISA 和 CRP 是最常用方法。
1. 胶体金法 原理:通过观察标记的抗体与抗原结合后是否出现肉眼可见的颜色来判定实验结果,操作方便,速度快;但是敏感性较低且不可重复。 适用范围:主要用于初筛,不能作为确诊试验。
2. 免疫荧光法 原理:利用免疫细胞表面特异性抗原与相应抗体间的相互作用,再通过荧光物质的标记进行定性或半定量分析。该方法可以同时检测多种抗体,但灵敏度不高。 适用范围:可用于检测多种病原体引起的感染,但敏感性低于 ELISA。
3. ELISA 原理:用酶标抗体与含待测抗体的样品反应,经酶标记物显色以确定样品中抗体的含量。 操作步骤:包括抗原抗体反应、酶标抗体反应和加底物显色三个步骤。整个过程需在暗室中完成。 适用范围:适用于大样本筛查,也可用于药物血清药理学研究。 ELISA 是目前应用最为普遍的免疫学检测技术之一。
4. 化学发光免疫分析法 原理:在碱性介质中,以过氧化物酶为催化剂,还原剂将非特异性荧光素转化为特异性荧光物质,其量和性质与样品中抗原浓度成比例。 根据荧光剂的类型可分为异硫氰酸荧光素免疫分析法和碱性磷酸酶免疫分析法。 适用范围:可检出低于 0.5 nmol/L 的抗原。对于某些病原微生物的检测结果甚至可以达到分子水平,对于传染病的诊断非常有帮助。